■ 产品描述:
人CD138+细胞阳选试剂盒通过免疫磁珠阳选,可从全血或骨髓样本中高效分离出CD138+细胞。该试剂盒通过在磁珠上偶联抗人CD138单克隆抗体,实现CD138阳性细胞的分选。
■ 产品信息:

■ 储存条件:
2-8°C保存,不可冷冻,有效期见试管标签。
■ 设备和试剂要求:
分选缓冲液:PBS,pH 7.2,0.5%BSA(或2%FBS),2 mM EDTA
耗材:70 μm无菌细胞滤网、离心管、无菌流式管
仪器:离心机、磁力架
■ 样本制备:
1.全血
收集全血到抗凝管中
2.骨髓
1)用5-10倍的DPBS稀释样本,充分混匀。
2)用70 μm的滤网过滤样本以去除骨渣及细胞团块。
3)300×g离心10 min。用吸管小心去除上层的血浆,注意不要吸到细胞层。
4)用适量细胞分选Buffer重悬细胞。
■ 注意事项:
1.建议选用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成磁珠和抗体的损耗。
2.5 mL流式管分选范围为1×10^7 cells至2×10^8 cells,此范围内分选效果最佳。
3.确保每一步无菌操作,谨防污染。
4.本产品仅适用于体外细胞培养,不可直接用于临床治疗。
■ 操作流程:
1.向1 mL抗凝全血或骨髓中,加入9倍体积的红细胞裂解液。
2.冰上放置15 min,期间轻轻涡旋混匀两次。(红细胞裂解后溶液应清亮透明)
3.4℃,450×g离心10 min以沉淀白细胞,小心吸弃上清液。
4.用100 μL分选Buffer重悬细胞,加入100 μL分选磁珠。
5.混合均匀,室温(15-25℃)孵育10 min。
6.加入3 mL分选Buffer,置于磁极中,静置5 min。
7.倾倒磁极以弃去上清。
8.重复步骤6-7两次,共三次。
9.重悬吸附于管壁的部分,此为纯化的CD138+细胞。
■ 分选效果:

起始样本为加入10-20%的U266细胞系的PBMC样本,使用人CD138+细胞阳选试剂盒分选CD138+细胞。分选前后的细胞用PE-CD138抗体染色后进行流式细胞分析。